細(xì)胞培養(yǎng)箱通常配備有加熱和制冷系統(tǒng)。加熱系統(tǒng)能夠?qū)⑾鋬?nèi)溫度升高并維持在一個(gè)適宜細(xì)胞生長(zhǎng)的范圍內(nèi),一般恒定在37°C左右;而制冷系統(tǒng)則可在需要時(shí)降低溫度或輔助調(diào)節(jié),確保溫度的穩(wěn)定性。培養(yǎng)箱還采用六面直熱系統(tǒng),使加熱均勻迅速,溫度恢復(fù)快,且溫度均勻性高、波動(dòng)度小。
為了防止培養(yǎng)液蒸發(fā),保持細(xì)胞所處的濕潤(rùn)環(huán)境,培養(yǎng)箱會(huì)通過(guò)特定的裝置來(lái)維持較高的濕度水平,大約為95。橫向雙循環(huán)風(fēng)道設(shè)計(jì)有助于保證溫濕度的均一性。對(duì)于二氧化碳培養(yǎng)箱而言,它能準(zhǔn)確地調(diào)控箱體內(nèi)的CO濃度。這是因?yàn)楹线m的CO濃度可以維持細(xì)胞培養(yǎng)液的pH值穩(wěn)定在7.2–7.4之間,這是細(xì)胞正常生長(zhǎng)所需的條件之一。同時(shí),配合進(jìn)口傳感器實(shí)現(xiàn)自動(dòng)補(bǔ)償,進(jìn)一步提高了控制的精度。
細(xì)胞培養(yǎng)箱的使用步驟:
1.準(zhǔn)備工作
-清潔與消毒:在使用前,需對(duì)培養(yǎng)箱內(nèi)部及放置樣品的區(qū)域進(jìn)行清潔和消毒,以防止微生物污染影響細(xì)胞培養(yǎng)效果??梢允褂?5酒精擦拭內(nèi)壁、擱板等部位。
-檢查設(shè)備狀態(tài):查看培養(yǎng)箱的各項(xiàng)指示燈是否正常亮起,確認(rèn)電源連接穩(wěn)定且無(wú)故障提示。同時(shí),檢查門(mén)封條是否完好,確保密封性良好,避免外界空氣過(guò)度進(jìn)入干擾箱內(nèi)環(huán)境。
2.參數(shù)設(shè)置
-溫度設(shè)定:依據(jù)所培養(yǎng)細(xì)胞的類(lèi)型和實(shí)驗(yàn)要求,在溫控面板上準(zhǔn)確地設(shè)置合適的溫度值。不同類(lèi)型的細(xì)胞有不同的生長(zhǎng)溫度范圍,如哺乳動(dòng)物細(xì)胞通常在37℃左右。
-濕度調(diào)節(jié):按照實(shí)驗(yàn)需求調(diào)整濕度水平。一般來(lái)說(shuō),大多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)需要相對(duì)較高的濕度環(huán)境,以保持培養(yǎng)基的水分平衡,防止干燥對(duì)細(xì)胞造成損害。通過(guò)加水或排水等方式來(lái)實(shí)現(xiàn)目標(biāo)濕度。
-CO2濃度控制:對(duì)于需要特定二氧化碳水平的細(xì)胞培養(yǎng)體系,準(zhǔn)確設(shè)置CO2濃度。CO2不僅影響著培養(yǎng)液的pH值,還參與細(xì)胞的一些生理過(guò)程??赏ㄟ^(guò)內(nèi)置的CO2傳感器和控制系統(tǒng)來(lái)進(jìn)行準(zhǔn)確調(diào)控。
3.預(yù)平衡驗(yàn)證:參數(shù)設(shè)置完成后,不要立即放入樣品,應(yīng)讓培養(yǎng)箱先運(yùn)行一段時(shí)間,使箱內(nèi)的實(shí)際溫度、濕度和CO2濃度達(dá)到并穩(wěn)定在設(shè)定值附近。這一過(guò)程稱(chēng)為預(yù)平衡,一般需要數(shù)小時(shí)甚至更長(zhǎng)時(shí)間,具體取決于設(shè)備的性能和環(huán)境條件。期間可使用專(zhuān)業(yè)的監(jiān)測(cè)儀器定期檢測(cè)箱內(nèi)的參數(shù)變化,直至確認(rèn)各項(xiàng)指標(biāo)均已穩(wěn)定且符合要求。
4.放入樣品:當(dāng)培養(yǎng)箱內(nèi)的環(huán)境參數(shù)穩(wěn)定后,將處理好的細(xì)胞樣本小心地放入培養(yǎng)箱內(nèi)的合適位置。注意不要過(guò)于密集地?cái)[放樣品,以保證空氣流通均勻,每個(gè)樣品都能充分接觸到適宜的培養(yǎng)條件。如果是多層擱板的培養(yǎng)箱,盡量平均分配樣品到各層。
5.實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)與記錄:在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,持續(xù)關(guān)注培養(yǎng)箱的工作狀態(tài)和參數(shù)變化。許多現(xiàn)代培養(yǎng)箱配備了數(shù)據(jù)記錄功能,可以自動(dòng)保存歷史數(shù)據(jù);也可以手動(dòng)定時(shí)記錄關(guān)鍵參數(shù),以便后續(xù)分析和追溯。若發(fā)現(xiàn)異常情況,如溫度波動(dòng)過(guò)大、濕度偏離設(shè)定范圍等,應(yīng)及時(shí)采取措施進(jìn)行調(diào)整或排查原因。